FasL基因siRNA真核表达载体的构建及意义
王建辉1
雷小婷1
赵国强2
张国俊1
1.郑州大学第一附属医院,河南郑州,4500522.郑州大学基础医学院
摘要:目的 构建针对细胞凋亡基因FasL的小干扰RNA(siRNA)表达载体,探讨载体介导的RNA干扰技术用于肺间质纤维化基因治疗的可行性.方法 依据siRNA靶序列的设计原则,以FasL mRNA为靶基因,合成两对编码短发卡结构的两条DNA序列,经退火合成DNA双链,再克隆至siRNA表达载体pSilencer2.0中,转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定.将构建的载体用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株,采用实时荧光定量PCR法检测细胞FasL mRNA水平变化.结果 成功构建发卡样FasL siRNA真核表达载体;其转染人肺腺癌A549细胞后,细胞FasL mRNA的表达水平显著下降.结论 FasLsiRNA真核表达载体能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasL mRNA的表达;本研究为肺间质纤维化的基因治疗奠定了基础.
关键词:FasL基因RNA干扰表达载体
分类号:R-33(实验医学、医学实验)
论文发表日期:2009-02-12
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 35-37 )
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