石蜡包埋乳腺癌组织的RNA提取及基因表达研究
孙冰1
郭晓红2
张利利3
张峰3
吴世凯1
宋三泰1
江泽飞1
王敦梅3
苏敏2
1.军事医学科学院附属医院,北京,1000712.汕头大学医学院3.中国科学院,北京基因组研究所
摘要：目的 探索从石蜡包埋乳腺癌样本中提取总RNA的质量和产量,并检测其基因的表达情况.方法 收集保存时间1～17 a不等的人乳腺癌石蜡组织样本153例,取5 μm厚切片1～15张,用Roche和Ambion两种试剂盒提取总RNA.采用随机引物将mRNA反转录为cDNA,SYBR Green Ⅰ染料法实时荧光定量PCR分析ACTB、GAPDH、RPLPO和GUSB管家基因mRNA的表达情况.结果 153例标本总RNA浓度在3～375 ng/μl范围,总产量0.18～18.5 μg,A260/280值在1.32～2.07范围,RNA琼脂糖凝胶电泳片段弥散在100～1 000 bp之间.81例样本的4个管家基因的平均Ct值在24～30范围,随着样本保存时间的延长,Ct值也逐渐增加.结论 从石蜡包埋样品标本中提取的RNA产量及质量可满足实验的要求,总RNA有所降解,但可以进行目的 基因mRNA的检测, 保存10 a以上的样本也能够进行基因表达研究,在基础研究和临床实践方面具有广阔的应用价值.
关键词：石蜡包埋组织RNA提取实时逆转录聚合酶链反应基因表达
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 15-17 )
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