锚定修饰的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ-IgGFc-GPI的构建及鉴定
许铁峰1
夏立平2
陈兴3
阎瑾琦3
于继云3
1.海南医学院肿瘤研究所,海口570102;军事医学科学院基础医学研究所2.海南医学院肿瘤研究所,海口,5701023.军事医学科学院基础医学研究所
摘要：目的 为研究锚定修饰的rmCGβ-IgGFc-GPI的新功能和免疫治疗奠定基础.方法 应用基因工程技术将pCI-IgGFc-GPI质粒经双酶切后,插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IgGFc-GPI,然后再插入经双酶切的恒河猴绒毛膜促性腺激素β亚基(rmCGβ亚基),构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ-IgGFc-GPI,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染B16细胞,流式细胞仪技术和细胞免疫荧光法检测B16细胞中表达的IgGFc段融合蛋白.结果 酶切和测序证明正确构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ-IgGFc-GPI,流式细胞仪技术和细胞免疫荧光法证实该质粒能在B16真核细胞中正确表达目的 蛋白;建立了稳定的细胞株B16/ pcDNA3.1(+)-rmCGβ-IgGFc-GPI.结论 锚定修饰的rmCGβ亚基的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ-IgGFc-GPI成功构建,且能在B16细胞内表达;为进一步研究锚定修饰的rmCGβ-IgGFc-GPI的新功能和免疫治疗奠定了基础.
关键词：锚定修饰蛋白绒毛膜促性腺激素β亚基
分类号：R97(药品)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(863;2001AA217131)海南省教育厅项目(Hjkj2006-26)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 16-19 )
英文信息