人GL50转基因细胞的构建及其生物学功能研究
刘彤1
王凤鸣2
孙静2
1.苏州农业职业技术学院,江苏苏州215008;苏州大学医学生物技术研究所2.苏州大学医学生物技术研究所
摘要：目的 构建稳定表达人GL50基因的小鼠成纤维母细胞L929细胞株,探讨GL50 信号通路对T细胞的共刺激效应.方法 Trizol一步法抽提人扁桃体细胞RNA,RT-PCR法扩增出GL50基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72 h,经Zeocin 筛选出稳定表达GL50分子的L929细胞株;采用3H-TdR掺入实验观察GL50信号对T 细胞体外培养的共刺激作用.结果 成功构建含GL50基因的重组逆转录病毒载体,并获得含有GL50基因的重组病毒,筛选获得能稳定高表达人GL50分子的L929转基因细胞;该转基因细胞对体外培养的T细胞具有促增殖和活化作用;同时,GL50/ICOS信号与CD28/B7 信号具有协同作用.结论 GL50/ICOS信号在机体免疫应答过程中起重要作用;GL50转基因细胞的成功构建为进一步研究GL50分子功能奠定了良好基础.
关键词：GL50基因逆转录病毒稳定表达增殖
分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 39-41 )