风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化
岳盈盈
李鹏
李志会
宋楠楠
赵元昊
纪璇
孟红
1.山东省医学科学院基础医学研究所,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,2500622.山东省医学科学院基础医学研究所,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,2500623.山东省医学科学院基础医学研究所,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,2500624.山东省医学科学院基础医学研究所,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,2500625.山东省医学科学院基础医学研究所,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,2500626.山东省医学科学院基础医学研究所,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,2500627.山东省医学科学院基础医学研究所,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,250062
摘要：目的 为风疹病毒(RV)感染提供特异性及敏感性高的检测手段.方法 采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202～353 aa片段,并将其插入表达载体pET30a(+),构建pET30a(+)-E1,转化BL21(plysS)菌株,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性;并探讨温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度和诱导时间对目的 蛋白表达产量的影响.结果 获得相对分子质量约为16.6 kD的融合蛋白,Western Blot证明其具有良好的抗原性,并确定该蛋白在30 ℃、0.6 mmol/L IPTG的条件下诱导表达4 h可获得最佳表达量.结论 本研究为RV包膜糖蛋白E1抗原纯化及应用奠定了基础,亦为研制生产高特异性和敏感性的RV检测试剂盒提供了实验依据.
关键词：风疹病毒包膜糖蛋白E1大肠杆菌表达条件优化
分类号：R371.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：山东省卫生厅青年基金资助项目(2007QZ024)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 18-19 )
英文信息