稳定表达乙型肝炎病毒X基因肝细胞株的构建
谢斌辉1
王小农1
刘凤恩1
钟宝元1
徐道峰1
何晓1
彭宝岗2
1.赣南医学院第一附属医院,江西赣州,3410002.中山大学附属第一医院
摘要:目的 构建稳定表达乙型肝炎病毒X基因(HBVx)的正常人肝细胞株.方法 用PCR法扩增含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的X基因序列,构建HBVx基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBVx,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并对其进行双酶切和测序鉴定;用脂质体转染法将HBVx基因导入Chang细胞系,G418筛选,RT-PCR和Western blot鉴定.结果 X基因亚克隆入pcDNA3.1(+),含有完整的X基因片段,转染后Chang细胞有HBVx mRNA表达,Chang/HBVx有HBVx蛋白的表达.结论 构建了稳定表达HBVx基因的肝细胞株Chang/HBVx.
关键词:肝细胞乙型肝炎病毒X基因真核表达载体转基因细胞模型
分类号:R735.7(消化系肿瘤)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:2( 10-11 )
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山东医药

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北大核心CSTPCD
ISSN:1002-266X
年,卷(期):2010,50(10)
所属栏目:论著