大鼠STAT3基因靶向shRNA真核表达载体的构建及鉴定
张五星1
周伟1
赵学伟1
丁晓然2
周喆2
张智敏1
周焕芝1
石炳毅1
1.解放军第309医院全军移植中心,北京,1000912.军事医学科学院放射与辐射医学研究所
摘要：目的 针对大鼠信号转导子及转录激活子3(STAT3)基因序列,构建特异性短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体.方法 根据STAT3基因序列及shRNA设计原则,设计4条干扰效果最佳的shRNA,化学合成4对引物,通过PCR扩增获得dsDNA模板,采用DNA重组技术与pGCsi-U6/Hygro/GFP空载体连接,转化DH5a感受态细胞经诱导表达筛选阳性克隆子,抽提重组质粒,进行DNA测序鉴定.结果 转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,测序结果与所设计的STAT3 shRNA转录模板序列一致.结论 所设计的shRNA编码序列被正确地插入到质粒骨架中,成功构建了STAT3基因的shRNA表达载体.
关键词：信号转导子及转录激活子3短发夹RNA质粒RNA干扰
分类号：Q344+.13(遗传学分支学科)
资助基金：国家自然科学基金(06Q071)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 13-15 )
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