TAT-p38(AF)融合肽的构建及其对紫外线诱导的p38 MAPK通路激活的抑制作用
张秀娟1
刘亚伟2
王娟2
邓鹏2
姜勇2
1.广东医学院,广东湛江,5240232.南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室
摘要：目的 构建TAT蛋白转导域介导的p38(AF)MAPK蛋白转导系统,研究该蛋白转导系统对紫外线刺激引起的p38通路激活作用的影响.方法 将p38无活性突变体p38(AF)亚克隆至含有TAT蛋白转导域的pET-14b-TAT质粒,原核表达、纯化His-TAT-p38(AF)融合蛋白.激酶实验检测His-TAT-p38(AF)自身磷酸化作用.将该蛋白与NHI/3T3细胞孵育,Western blot法检测该蛋白的蛋白转导功能;紫外线照射后,检测内源性p38及其底物ATF2的磷酸化水平.结果 酶切、测序表明质粒构建正确;目的 蛋白被正确表达;His-TAT-p38(AF)融合蛋白无自身磷酸化作用;His-TAT-p38(AF)蛋白以浓度依赖性方式高效转导入细胞;His-TAT-p38(AF)的导入抑制紫外线诱导的内源性p38及其底物ATF2的磷酸化.结论 TAT蛋白转运系统能高效转导外源蛋白进入真核细胞;p38无活性突变体TAT-p38(AF)抑制紫外线诱导的p38 MAPK通路的激活.
关键词：p38丝裂原活化蛋白激酶紫外线蛋白转导域
分类号：Q291(细胞生物学)
资助基金：国家自然科学基金(30572151)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 19-21 )
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