SYBR Green I荧光定量PCR检测HIV-1前病毒方法的建立及应用
莫雪梅
闫莉
孙晗笑
1.暨南大学药学院基因组药物研究所,广州,5106322.暨南大学药学院基因组药物研究所,广州,5106323.暨南大学药学院基因组药物研究所,广州,510632
摘要：目的 建立SYBR Green I荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用.方法 选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6 μg/ml～6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响.结果 所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101 Copies,其标准曲线的相关系数为0.998 9,斜率为-4.925,截距为35.70;除6 ng/ml的 rvMIP、AZT、T-20外,三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05),并呈质量浓度依赖性;联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20 <rvMIP+AZT<rvMIP<T-20<AZT.结论 本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有灵敏、快速、准确及成本低廉等优点;与T-20或AZT联用可增强rvMIP对HIV-1前病毒的抑制作用.
关键词：聚合酶链反应实时性重组病毒巨噬细胞炎症蛋白人类免疫缺陷病毒-1前病毒载量
分类号：R512.91(传染病)
资助基金：国家自然科学基金(30872221)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 10-12 )
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