含hTERT启动子、PE38KDEL片段质粒构建及其对人胰腺癌细胞凋亡的影响
李宝玉
孙晋津
陈剑秋
1.天津医科大学第二医院,天津,3002112.天津医科大学第二医院,天津,3002113.天津医科大学第二医院,天津,300211
摘要：目的 构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并观察其对人胰腺癌MiaPaCa2细胞凋亡的影响.方法 采用PCR法构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并用双酶切法鉴定;将MiaPaCa2细胞分为5组,A组为空白对照组,仅加入含10% FBS的DMEM;B、C、D、E组分别转染pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,采用TUNEL法检测MiaPaCa2细胞的凋亡指数.结果 重组质粒的PCR产物及酶切后片段的测序结果与GeneBank报道序列一致.A组转染24、48 h时MiaPaCa2细胞凋亡率分别为17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B组分别为18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C组为19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D组为29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E组为72.16%±4.79%、86.40%±7.71%.B～E组与A组比较,P均<0.05;E组与D组比较,P<0.05.结论 成功构建了含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,该质粒可促进人胰腺癌MiaPaCa2细胞的凋亡.
关键词：胰腺癌人端粒酶反转录酶启动子铜绿假单胞菌外毒素绿色荧光蛋白基因疗法
分类号：R753.9(皮肤病学与性病学)
资助基金：教育部博士点基金资助项目(20060062008)天津市自然科学基金自助项目(07JCYBJC10300)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 4-6 )
英文信息