真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL,pIRES2-EGFP/CD的构建和鉴定
梁兵
袁芳
殷建瑞
谭丽华
高庆春
高聪
1.广州医学院第二附属医院神经科学研究所,广州,5102602.广州医学院第二附属医院神经科学研究所,广州,5102603.广州医学院第二附属医院神经科学研究所,广州,5102604.广州医学院第二附属医院神经科学研究所,广州,5102605.广州医学院第二附属医院神经科学研究所,广州,5102606.广州医学院第二附属医院神经科学研究所,广州,510260
摘要：目的 构建真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用提供基础.方法 将pCMV/CD质粒和pcDNA3.1(+)/TRAIL质粒行琼脂糖凝胶电泳检测,确定其完整性,并进行序列测定确定有无基因突变.pCMV/CD质粒用Sac Ⅱ/ Xho Ⅰ双酶切,pcDNA3.1(+)TRAIL质粒用BamH Ⅰ/XhoⅠ双酶切,将目的 基因定向克隆到真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中,转化E.coli DH5α感受态细胞,通过限制性内切酶双酶切、PCR及核酸序列分析等筛选、鉴定重组质粒.结果 所构建的真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL经Sac Ⅱ/ XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.0、5.2 kb;pIRES2-EGFP/CD经BamH Ⅰ/XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.3、5.2 kb.PCR及测序证实,pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD质粒基因组中分别包含TRAIL和CD基因.结论 成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用奠定了基础.
关键词：真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAILpIRES2-EGFP/CD
分类号：Q343.1+7(遗传学分支学科)
资助基金：广州医学院博士启动基金项目(2008c46)广东省自然科学基金项目(8151018201000036)广东省自然科学基金项目(10451018201004383)广东省科技计划项目(2009B0130801363)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 21-23 )
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