慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因转染血管内皮祖细胞的实验研究
宋淑敏
刘铭
彭强
植勇
杨春
1.泸州医学院附属医院,四川泸州,6460002.泸州医学院附属医院,四川泸州,6460003.泸州医学院附属医院,四川泸州,6460004.泸州医学院附属医院,四川泸州,6460005.泸州医学院附属医院,四川泸州,646000
摘要：目的 探讨HIV-1来源的慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(GFP)基因转染血管内皮祖细胞(EPCs)的可行性和方法.方法 用梯度密度离心法分离人脐带血内皮祖细胞,在EGM-2培养基中培养.用细胞免疫荧光染色和流式细胞仪检测其表达情况.以HIV-1来源的慢病毒为载体、以GFP基因为目的 基因转染EPCs,MTT法检测不同病毒滴度(MOI)时细胞增殖情况并观察转染率.结果 单个核细胞经EGM-2培养基培养1周后即分化成EPCs.GFP转染后48 h细胞即发出绿色荧光.MOI 1:10转染组细胞转染率低于MOI 1:50组(P＜0.05).MOI 1:50转染后的细胞与未转染GFP组比较,生长曲线无明显差异(P＞0.05).MOI 1:100组转染后细胞的增殖处于停滞状态.结论 采用HIV-1来源的慢病毒载体介导GFP基因转染标记EPCs是可行的.以MOI 1:50进行转染对细胞生长影响小,转染效率高.
关键词：血管内皮祖细胞转染慢病毒绿色荧光蛋白质类
分类号：R329.2(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(30700876)四川省教育厅项目(2006B026)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 27-29 )
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