鼠IL-2基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建
黄大林1
袁桂峰1
王鑫2
李彬彬2
钟江2
1.桂林医学院,广西桂林,5410042.复旦大学
摘要：目的 构建携带鼠IL-2基因的重组杆状病毒表达载体.方法 将目的 基因鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定;将pFB-CMV-IL-2转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态菌中,筛选阳性克隆,获得重组杆状病毒载体Bacmid-pFB-CMV-IL-2,抽提质粒;用脂质体转染法将Bacmid-pFB-CMV-IL-2转染Sf9昆虫细胞包装病毒;收获完整重组杆状病毒,反复感染Sf9细胞扩增病毒,提取杆状病毒基因组,用PCR验证重组杆状病毒的正确性.结果 成功构建鼠IL-2基因杆状病毒表达载体.结论 本试验为进一步在哺乳细胞中表达鼠IL-2基因、开发研究IL-2奠定了基础,同时亦为其他蛋白质的真核细胞表达提供了方法参考.
关键词：白细胞介素2杆状病毒科载体质粒小鼠
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30770079)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 37-39 )