hPRA、hPRB真核表达载体及其转基因人子宫内膜癌细胞系的构建
李大鹏1
李崇2
盛修贵3
1.山东省肿瘤医院,济南250117;山东省医学科学院2.济南市传染病医院3.山东省肿瘤医院,济南,250117
摘要:目的 构建人孕激素受体(hPR)亚型hPRA、hPRB真核表达载体,并以此建立表达不同hPR亚型的人子宫内膜癌细胞系.方法 构建真核表达载体pcDNA3.1-hPRA、pcDNA3.1-hPRB,采用脂质体介导法转染hPR阴性的人子宫内膜癌细胞系HECCA,将HECCA分3组,前2组分别转染pcDNA3.1-hPRA、pcDNA 3.1-hPRB,同时转染两种质粒.Western blot技术检测转染细胞中hPRA、hPRB的表达.结果 经限制性内切酶鉴定及序列分析,pcDNA3.1-hPRA、pcDNA3.1-hPRB构建正确.pcDNA3.1-hPRA、pcDNA3.1-hPRB成功转染HECCA后,在HECCA中检测出了hPRA、hPRB表达,建立了3株转染细胞:HECCA-A只表达hPRA,HECCA-B只表达hPRB,hECCA-AB表达hPRA及hPRB.结论 成功构建了hPRA、hPRB真核表达载体,载体转染后的HECCA能分别稳定表达hPRA、hPRB,建立了表达不同hPR亚型的人子宫内膜癌细胞系.
关键词:子宫内膜肿瘤孕激素受体质粒转染细胞系
分类号:R737.33(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金:山东省自然科学基金(Y2007C146)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 24-26 )
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