腈水解酶2基因沉默细胞模型的制备
吕杨
苏华宾
谢院生
陈香美
1.解放军总医院肾病科,全军肾脏病研究所暨重点实验室,北京,1008532.解放军总医院肾病科,全军肾脏病研究所暨重点实验室,北京,1008533.解放军总医院肾病科,全军肾脏病研究所暨重点实验室,北京,1008534.解放军总医院肾病科,全军肾脏病研究所暨重点实验室,北京,100853
摘要：目的 为腈水解酶2(NIT2)基因研究奠定基础.方法 采用siRNA质粒转染技术制备NIT2基因沉默细胞模型,用筛网方法从大鼠肾脏中提取出肾小球用于培养原代系膜细胞,将NIT2靶序列构建pGU6/CFP/Neo质粒中(siNIT2质粒),采用JETPRIME脂质体转染法将质粒转染入原代系膜细胞中,48 h后荧光显微镜观察转染效率,利用SYBR GREEN 1定量PCR法检测NIT2基因表达,琼脂糖凝胶电泳观察PCR产物.结果 荧光显微镜下转染阳性率可达50%,定量PCR结果示siNIT2质粒转染后NIT2 mRNA显著降低,琼脂糖电泳结果示PCR产物无明显杂带.结论 siRNA质粒转染法可抑制原代系膜细胞NIT2基因的表达;为NIT2基因功能研究奠定了基础.
关键词：系膜细胞腈水解酶2基因转染
分类号：R394.8(医学遗传学)Q343(遗传学分支学科)
资助基金：国家自然科学基金(81000772)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2007CB507400)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 16-18 )
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