细胞外基质金属蛋白酶诱导因子RNAi慢病毒载体的构建
涂燕
李振江
汤爱萍
李慧慧
贺文凤
李洁
张冉
1.南昌大学第二附属医院,南昌,3300062.南昌大学第二附属医院,南昌,3300063.南昌大学第二附属医院,南昌,3300064.南昌大学第二附属医院,南昌,3300065.南昌大学第二附属医院,南昌,3300066.南昌大学第二附属医院,南昌,3300067.南昌大学第二附属医院,南昌,330006
摘要：目的 构建人细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN) RNA干扰(RNAi)慢病毒载体.方法 参照文献设计RNAi靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Age Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生RNAi慢病毒载体pGC-LV.PCR鉴定阳性克隆并测序,将测序正确的pGC-LV、pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒经脂质体2000共转染293T细胞,获得重组慢病毒,用逐孔稀释法测定病毒滴度.结果 合成的含EMMPRIN vshRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确；病毒包装后滴度为1×109 TU/ml.结论 应用基因工程技术成功构建了可供感染的EMMPRIN基因RNAi慢病毒载体,此为进一步研究EMMPRIN在急性白血病中的作用奠定了实验基础.
关键词：细胞外基质金属蛋白酶诱导因子RNA干扰慢病毒载体
分类号：R733.7(造血器及淋巴系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30800490)江西省青年科学家(井冈之星)培养对象项目(2009DQ02000)
论文发表日期：2011-08-13
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 16-18 )
英文信息