hSp17真核表达载体构建及其在卵巢癌细胞中的表达
缪家文1
张海燕1
张春华2
李芳秋2
1.镇江市第三人民医院,江苏镇江,2120052.南京军区南京总医院
摘要:目的 构建人精子蛋白17(hSp17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/hSp17,为其临床应用奠定基础.方法 用PCR方法获取hSp17基因片段,Nhe Ⅰ、Kpn Ⅰ双酶切、粘端连接的方法构建含有hSp17基因的peDNA3.1(+)/hSp17真核表达载体.将该载体行脂质体介导转染卵巢癌细胞HO8910,免疫细胞化学方法检测转染细胞hSp17蛋白表达,G418筛选稳定表达hSp17蛋白的细胞株.结果 酶切和测序结果均证实pcDNA3.1(+)/hSp17重组质粒的构建完全正确.免疫细胞化学方法证实外源性hSp17基因能够在卵巢癌HO8910细胞瞬时表达.经G418连续筛选,得到阳性克隆细胞株,并证实了外源性hSp17基因在卵巢癌HO8910细胞中稳定表达.结论 成功构建了稳定表达外源性hSp17蛋白的卵巢癌细胞株;其可为卵巢癌的免疫治疗奠定基础.
关键词:人精子蛋白17卵巢肿瘤卵巢癌真核表达载体免疫细胞化学
分类号:R737.31(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金:国家自然科学基金(30670599)科技计划(FZ2008056)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 1-3 )
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