凋亡素VP3蛋白的原核表达及纯化
邓守恒1
柯贤柱1
石小燕2
蔡召忠1
杨敬宁3
黄永章1
陈萍1
1.湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心,湖北十堰,4420002.武汉市中心医院3.湖北医药学院免疫教研室
摘要：目的 构建凋亡素VP3蛋白的原核表达质粒,并进行诱导表达和蛋白纯化.方法 采用PCR法自PGEX-6 P-1/TAT-VP3质粒中扩增VP3基因,运用靶向克隆酶将VP3基因插入线性pET15b,构建重组表达质粒pET-15b-VP3；经测序证实构建成功后转化E.coli Rosetta,表达凋亡素VP3蛋白；经Ni-NTA树脂亲和层析,对纯化产物进行SDS-PAGE、Western blotting分析鉴定.结果 成功构建凋亡素VP3蛋白原核表达质粒,表达并纯化了分子量为13.6 kD的凋亡素VP3蛋白.结论 凋亡素VP蛋白原核表达载体的构建及目的蛋白的表达纯化,为体内应用凋亡素VP3蛋白进行抗肿瘤研究奠定了基础.
关键词：凋亡素VP3分离提纯
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：湖北省卫生厅青年基金(QJX2008-42)湖北医药学院创新基金(2010XSA02)十堰市科技局项目(2010st24)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 42-43 )