弓形虫MIC3基因真核表达质粒的构建及其在BHK细胞中的表达
唐莉娜
刘涛
黄雨婷
徐丽娜
卢丽丹
1.贵州省疾病预防控制中心,贵阳,5500402.贵州省疾病预防控制中心,贵阳,5500403.贵州省疾病预防控制中心,贵阳,5500404.贵州省疾病预防控制中心,贵阳,5500405.贵州省疾病预防控制中心,贵阳,550040
摘要：目的 构建弓形虫微线体蛋白( MIC3)的真核表达质粒,为进一步研究MIC3蛋白的功能奠定基础.方法 PCR法扩增弓形虫MIC3目的基因,将纯化的目的基因插入到真核表达质粒PCDNA3.0,并转入DH5α 宿主菌中,在含有青霉素的SOB平板上筛选阳性重组子,采用酶切和PCR扩增法对重组质粒进行鉴定；应用HifectinⅡ真核细胞转染试剂将弓形虫PCDNA-MIC3真核表达质粒转染幼地鼠肾细胞(BHK),表达产物用SDS-PAGE进一步确认,ELISA法检测表达蛋白的免疫原性.结果 重组质粒PCDNA-MIC3经单双酶切及PCR扩增都得到以原插入片段MIC3基因1120 bp大小相同的片段,PCDNA-MIC3能在BHK细胞中高效表达,表达产物能被弓形虫特异性血清所识别.结论 成功构建了弓形虫MIC3基因真核表达质粒PCDNA-MIC3.
关键词：弓形虫微线体蛋白真核表达质粒PCDNA-MIC3表达
分类号：R382.5(医学寄生虫学)
资助基金：2005年贵州省优秀科技教育人才生长专项资金项目(黔省专合字(2005)234号)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 11-13 )
英文信息