Ad-hTIMP1感染对Hcy刺激人脐静脉内皮细胞MMP1、MMP9、TIMP1 mRNA表达的影响
李汇1
毛用敏2
赵莉莉2
崔让庄2
王佩显1
1.天津医科大学总医院,天津,3000522.天津市胸科医院
摘要：目的 构建携带人金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的重组腺病毒Ad-人TIMP1(hTIMP1),将其感染用同型半胱氨酸(Hcy)刺激的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,观察该细胞基质金属蛋白酶(MMP)1、MMP9、TIMP1mRNA的表达变化.方法 在大肠杆菌BJ5183中通过同源重组构建重组腺病毒Ad-hTIMP1和对照重组腺病毒Ad-Track.将CRL-1730细胞分为空白对照组、Track对照组和基因治疗组,并根据加入Hcy浓度的不同各分为三个亚组,即空白对照组、生理浓度组和病理浓度组.病毒感染48 h后加入Hcy刺激,6h后收集各组CRL-1730细胞,RT-PCR法检测CRL-1730细胞中的MMP1、MMP9、TIMP1 mRNA.结果 Ad-hTIMP1和Ad-Track的滴度分别为1.9×1012 VP/mL和0.6×1012 VP/mL.基因治疗组Ad-hTIMP1感染CRL-1730细胞后,该细胞的TIMP1 mRNA表达明显高于空白对照组(P＜0.05),即使加入病理浓度的Hcy,CRL-1730细胞中TIMP1 mRNA的表达仍处于高水平,而MMP1、MMP9 mRNA的表达明显降低(P均＜0.05).结论 成功构建了Ad-hTIMP1和Ad-Track.重组腺病毒Ad-hTIMP1感染CRL-1730细胞后,该细胞中TIMP1 mRNA过表达,可抑制高浓度Hcy刺激造成的MMP1、MMP9 mRNA的表达升高,提示其可对抗Hcy对内皮细胞的损伤.
关键词：腺病毒金属蛋白酶组织抑制剂基质金属蛋白酶同型半胱氨酸基因疗法
分类号：R34(基础医学)R541.4(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：天津市自然科学基金(033609911)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 11-14 )
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