类风湿关节炎患者Ⅱ型胶原蛋白cDNA基因的克隆及序列分析
王安宇1
魏良纲1
乔艺杰1
张超1
张定安1
何光志2
1.贵阳中医学院第二附属医院,贵阳,5500022.贵阳中医学院基础医学院
摘要:目的 克隆人Ⅱ型胶原蛋白cDNA(hCⅡcDNA)基因.方法 以类风湿关节炎患者关节软骨组织的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hCⅡcDNA基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,在LB培养基中培养12 ~ 16 h,挑取菌落并接种于LB培养液中,取2μL菌液为模板进行PCR鉴定,PCR结果呈现特异性条带为hCⅡcDNA阳性.对hCⅡcDNA阳性的克隆菌株进行测序.结果 克隆基因经测序并通过NCBI BLAST分析后发现,其与Genebank中公布的编码人Ⅱ型胶原蛋白的基因序列(NM_001844)同源性达99%.结论 成功克隆出了hCⅡcDNA基因.
关键词:类风湿关节炎Ⅱ型胶原蛋白cDNA基因克隆基因序列
分类号:R394(医学遗传学)R392(医学免疫学)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 15-17 )
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