提高O-糖基化水平对CHO-K1细胞突变型tau蛋白过度磷酸化的影响
王景景1
郑晨1
丁楠1
熊慧1
宋金芝1
赵纲2
邓艳秋1
1.天津医科大学,天津,3000702.天津肿瘤医院
摘要：目的 观察提高O-糖基化水平对CHO-K1细胞中突变型R406W tau蛋白过度磷酸化及细胞轴突转运功能的影响.方法 分别将突变型PSG-5 R406W tau质粒和PSG-5空载体质粒转染CHO-K1细胞.将成功转染PSG-5 R406W tau质粒的CHO-K1细胞分为实验组与对照组,分别加入20μM的NAG-Ae及等量的DMEM/F12培养基,转染PSG-5空载体的细胞为空载体组,培养12 h.用Western blot法检测tau蛋白表达；免疫印迹法检测实验组与对照组细胞tau蛋白的糖基化及磷酸化水平；荧光漂白后恢复技术(FRAP)检测三组细胞漂白后荧光恢复的速度以表示细胞轴突转运速度.结果 转染空载体的细胞未见tau蛋白表达,转染PSG-5 tau R406W的细胞tau蛋白呈高表达.实验组与对照组细胞O-糖基化水平分别为1.30±0.09、0.59 ±0.04(P ＜0.05).实验组tauThr205、tauSer396、tauThr212位点磷酸化水平分别为0.44±0.21、0.98±0.01、0.44±0.19,对照组分别为1.11 ±0.38、1.34±0.22、0.79 ±0.05,两组相比,P均＜0.05.10、40、70 s时实验组荧光强度分别为262.00±12.50、300.00±10.00、461.66±10.40,对照组分别58.33±10.40、131.66±11.54、208.33±14.43,空载体组分别为514.00±10.14、888.33±11.06、1188.00± 10.60,三组相比,P均＜0.05.结论 提高CHO-K1细胞的O-糖基化水平有助于减轻突变型tau蛋白的过度磷酸化水平,改善细胞轴突转运功能.
关键词：葡萄糖胺酶抑制剂NAG-AeO-糖基化tau蛋白磷酸化神经退行性疾病
分类号：R741(神经病学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 25-28 )
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