RNAi沉默Notch1基因对人骨肉瘤细胞MG63的促凋亡作用
吴德明
杨志强
刘翔
江川
戴闽
1.南昌大学第一附属医院,南昌,3300062.南昌大学第一附属医院,南昌,3300063.南昌大学第一附属医院,南昌,3300064.南昌大学第一附属医院,南昌,3300065.南昌大学第一附属医院,南昌,330006
摘要:目的 采用RNA干扰(RNAi)技术抑制Notch1基因的表达,观察阻断Notch信号通路对人骨肉瘤细胞MG63的促凋亡作用及其机制.方法 构建mNotch-1短发夹状RNA(mNotch-1 shRNA),利用MTT增殖试验分析mNotch-1 shRNA转染前及转染24、48、72 h时MG63细胞的增殖情况;通过Annexin V法染色和流式细胞术检测细胞凋亡率及与mNotch-1 shRNA作用时间的关系;Western blot检测细胞中Notch1、Bcl-2及Bax蛋白表达的变化.结果 与对照组相比,mNotch-1 shRNA转染MG63细胞后,细胞增殖水平明显下降.Annexin V染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高.Western blot结果分析显示mNotch-1 shRNA转染MG63细胞后,细胞中Notch1基因表达明显降低,并且显著抑制Bcl-2基因和上调Bax基因的表达.结论 RNAi沉默Notch1基因能明显抑制人MG63细胞增殖,促进细胞凋亡;其作用机制可能与调控Bcl-2及Bax蛋白表达有关.
关键词:骨肉瘤RNA干扰Notch1基因细胞凋亡
分类号:R738.1(运动系肿瘤)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 36-38 )
