细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建
孙德旭1
秦苏萍2
王晓天2
李小翠2
刘志强3
1.徐州医学院人体解剖学教研室,江苏徐州,2210042.徐州医学院病原微生物学教研室3.the University of Texas Health Science Center at San Antonio
摘要：目的 构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞.方法 分别克隆FGF18基因启动子区域的5’同源臂和3’同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒.提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区.结果 经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC.结论 成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产.
关键词：FGF18绿色荧光蛋白细菌人工染色体同源重组
分类号：Q816(生物工程学(生物技术))
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 11-14 )
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