大鼠糖皮质激素受体基因Ad5/F35型腺病毒载体的构建与鉴定
王涛1
邢昌赢2
袁自静3
钱军2
赵秀芬2
朱江3
1.南京市江宁医院,南京211100;南京医科大学第一附属医院2.南京医科大学第一附属医院3.南京市江宁医院,南京,211100
摘要：目的 构建大鼠糖皮质激素受体(GR)基因到Ad5/F35型腺病毒载体并鉴定.方法 将pcDNAl Neo-Rat GR的质粒经酶切获得Rat GR cDNA酶切片段,与载体质粒pDC316的酶切片段一同转染到感受态大肠杆菌DH-5α中,构建重组穿梭载体pDC316-GR;进行PCR、酶切、测序鉴定,确定构建成功后与腺病毒骨架质粒Ad5/F35一同转染到293细胞进行同源重组,得到Ad35-GR毒种,并进行PCR鉴定.结果 经酶切、PCR方法鉴定构建了大鼠GR的重组腺病毒,氯化铯梯度离心纯化最终获得2.8×1011 PFU/mL滴度的重组病毒.结论 成功构建了大鼠GR的高滴度重组腺病毒.
关键词：糖皮质激素受体腺病毒载体转染大鼠
分类号：R318.16(医用一般科学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 25-27 )