成纤维细胞生长因子23蛋白原核表达及条件优化
倪培1
刘孝菊2
腾春燕1
王春娥1
肖贺欣1
李校堃3
于庭1
1.吉林大学第二医学院,长春,13000412.吉林大学第二医学院,长春1300041;吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;温州医学院药学院3.吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;温州医学院药学院
摘要：目的 制备具有生物学活性的可溶性重组人成纤维细胞生长因子23(FGF23),并探讨其最佳诱导表达条件.方法 克隆FGF23和SUMO-FGF23两个cDNA序列,分别与原核表达载体pET3c与pET22b相连,转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)和BL21 (DE3)宿主菌中,对FGF23表达的最佳质粒和宿主菌组合进行筛选,并对Rosetta (DE3)/pET22b-SUMO-FGF23重组菌株的最佳诱导表达条件进行优化.结果 只有pET-SUMO-FGF23的质粒和Rosetta(DE3)的组合有FGF23蛋白质表达;融合蛋白在16℃、0.4 mmol/L IPTG诱导19 h以可溶形式表达,且上清表达量占菌体总蛋白的28％.结论 本研究成功获得了高表达量及可溶性的重组FGF23,最佳表达条件是16℃、0.4 mmol/L IPTG诱导表达19 h.
关键词：重组成纤维细胞因子23原核构建诱导表达条件优化
分类号：R34(基础医学)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2011AA02A113)科技计划(2010X0029)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 4-7 )
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