利用适配子筛选结核杆菌H37Rv毒力基因方法探讨
周菁
陈军
任易
陈丽峰
1.武汉市结核病防治所,武汉,4300302.武汉市结核病防治所,武汉,4300303.武汉市结核病防治所,武汉,4300304.武汉市结核病防治所,武汉,430030
摘要：目的 建立结核杆菌H37Rv的基因组文库,利用特异性结合H37Rv的适配子,筛选出H37Rv的毒力基因.方法 H37Rv经溶菌酶、蛋白酶K破菌后,提取结核杆菌基因组,用Sau3AI酶切后,连入pET28a,转入大肠杆菌BL21表达,提取蛋白,非变性蛋白电泳后,转入PVDF膜,用生物素标记的适配子与蛋白杂交,SABC试剂显色,将能与适配子反应的克隆子测序,与结核杆菌基因组序列比对,找出可疑的毒力基因.结果 建立了含有711个克隆子的H37Rv基因组表达文库,通过比较分析,找出两个可疑基因:aroF与PPK.结论 本研究利用适配子筛选出了2个结核杆菌H37Rv的毒力基因,建立了一种从结核杆菌基因组文库中筛选H37Rv毒力基因的方法.
关键词：结核分枝杆菌基因组文库适配子毒力基因
分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：武汉市卫生局课题资助项目(WX12A03)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 11-14 )
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