HepG2细胞电转染条件的优化
张禾璇
何燕
张婷
王婵娟
单可人
官志忠
1.贵阳医学院分子生物学重点实验室,贵阳,5500042.贵阳医学院分子生物学重点实验室,贵阳,5500043.贵阳医学院分子生物学重点实验室,贵阳,5500044.贵阳医学院分子生物学重点实验室,贵阳,5500045.贵阳医学院分子生物学重点实验室,贵阳,5500046.贵阳医学院分子生物学重点实验室,贵阳,550004
摘要：目的 优化HepG2细胞电转染条件,进一步提高HepG2细胞的转染效率.方法 采用电穿孔方法将pcDNA3.1-EGFP导入HepG2细胞中,在500 μL电转染体系中,在不同电场强度、细胞数目、脉冲频率、脉冲时间、电转质粒数目、电转缓冲液、培养基血清浓度条件下,分别将pcDNA3.1-EGFP质粒电转染HepG2细胞,检测不同条件下细胞存活率和转染率.结果 电转前4℃孵育电转体系混合液10 min,方波电转条件在1个电脉冲、电压270V、细胞数为2×106个、质粒20 μg、脉冲时间20 ms、电转缓冲液为优化缓冲液、电转后置于37℃、含15％ FBS的DMEM高糖培养基中培养48 h,可获得高转染率(60.68±1.87)％.结论 优化电穿孔法的电转染条件能够有效提高HepG2细胞的电转染效率.本研究为外源基因电转染HepG2细胞提供了可靠的试验参数.
关键词：电转染HepG2细胞转染效率pcDNA3.1-EGFP
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：国家“十二五”科技支撑计划项目(2013BAI05B03)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-4,8 )
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