高表达重组人组织激肽释放酶7基因的前列腺癌单克隆细胞株的构建
林志弟1
莫林键1
张成东2
宣强1
张悦宁2
莫曾南1
滕若冰1
杨小丽3
1.广西医科大学第一附属医院2.广西医科大学医学科学实验中心3.广西医科大学第一附属医院; 广西医科大学医学科学实验中心
摘要：目的：建立稳定高表达重组人组织激肽释放酶7基因（ KLK7）的前列腺癌细胞株DU145，为前列腺癌发生机制的研究奠定基础。方法 PCR法扩增KLK7 cDNA，并克隆到真核表达载体pcDNA3．1上；经过限制性内切酶酶切、DNA测序验证正确后，以脂质体法转染人前列腺癌DU145细胞；通过G418筛选，每个单克隆细胞扩大培养，建立稳定转染KLK7的DU145单克隆细胞株。采用Western blot 法检测DU145细胞株KLK7表达。结果酶切鉴定及DNA 测序分析显示 pcDNA3．1-KLK7真核表达载体成功构建；转染后，成功获得稳定高表达KLK7的DU145单克隆细胞株。 Western blot 结果显示，pcDNA3．1-KLK7转染的DU145细胞KLK7表达量明显高于转染空载体组细胞（P＜0．01）。结论 pcDNA3．1-KLK7真核表达载体的建立及稳定高表达KLK7的前列腺癌单克隆细胞株的建立，为研究KLK7在前列腺癌发生发展中的作用提供了条件。
关键词：重组人组织激肽释放酶基因7前列腺癌稳定细胞株真核表达载体
分类号：R697.3-35(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
资助基金：国家自然科学基金(81060214)高等学校博士学科点专项科研基金(20104503120008)广西自然科学基金(2011GXNSFA018175)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1-3 )
英文信息