pGPH1-GFP-RKIP 的构建及其对白血病细胞株 CCRF-CEM 化疗敏感性的影响
李青1
多力坤2
1.武警兵团指挥部医院,乌鲁木齐,8300632.新疆医科大学第一附属医院
摘要:目的:构建Raf 激酶抑制蛋白( RKIP )小干扰RNA ( siRNA )重组质粒pGPH1-绿色荧光蛋白( GFP )-RKIP,观察其对白血病细胞株CCRF-CEM化疗敏感性的影响。方法构建RKIP的siRNA重组质粒pGPH1-GFP-RKIP,电穿孔转染至儿童白血病细胞CCRF-CEM,以Western blot法检测细胞RKIP、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、磷酸化核因子κB抑制蛋白(p-IκB);以不同浓度9-硝基喜树碱(9NC)处理上述细胞,Western blotting法检测细胞RKIP,流式细胞仪法检测细胞caspase-3活性(计算细胞凋亡率),同上检测RKIP表达。结果成功构建pG-PH1-GFP-RKIP;pGPH1-GFP-RKIP和pGPH1-GFP的转染效率分别为90.04%、91.32%;与pGPH1-GFP转染的细胞比较,pGPH1-GFP-RKIP转染的细胞RKIP表达下调,p-ERK、p-IκB表达上调(P均<0.05);9NC处理后CCRF-CEM细胞RKIP表达上调、细胞凋亡率下降(P均<0.05)。结论成功构建了RKIP的siRNA质组质粒,RKIP表达变化可能与白血病细胞化疗敏感性有关。
关键词:Raf激酶抑制蛋白RNA干扰儿童白血病化疗敏感性
分类号:R733.7(造血器及淋巴系肿瘤)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 20-23 )
英文信息
