RNA 干扰抑制 EZH2基因表达对人胶质瘤细胞凋亡及对卡莫司汀敏感性的影响
周章明1
楚胜华2
1.成都大学附属都江堰医疗中心,四川都江堰,6118302.上海交通大学附属第三医院
摘要:目的:观察RNA干扰技术抑制EZH2基因表达对人胶质瘤U251细胞凋亡及其对卡莫司汀敏感性的影响。方法针对EZH2 mRNA序列设计合成小干扰RNA( siRNA)的DNA模板,构建pRNAT-EZH2重组表达载体,并用其转染人胶质瘤U251细胞。用RT-PCR法检测pRNAT-EZH2转染前后U251细胞中内源性EZH2表达;激光共聚焦显微镜观察转染后及加入卡莫司汀后U251细胞凋亡情况;MTT法检测转染前后U251细胞对化疗药物卡莫司汀敏感性;用分光光度法检测转染前后以及加入卡莫司汀后U251细胞中Caspase-3活性。结果成功构建pR-NAT-EZH2重组质粒,并成功转染U251细胞。 pRNAT-EZH2重组质粒转染后U251细胞中EZH2 mRNA表达量降低( P<0.01);卡莫司汀组及卡莫司汀加pRNAT-EZH2组U251细胞凋亡明显;与卡莫司汀联合时,pRNAT-EZH2组U251细胞生长抑制率明显增高(P<0.01);Caspase-3活性明显高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.01)。结论 pRNAT-EZH2可抑制EZH2在人胶质瘤U251细胞中的表达,并增强U251细胞对卡莫司汀敏感性。
关键词:果蝇zeste基因增强子人类同源物2小干扰RNA胶质瘤药物敏感性细胞凋亡卡莫司汀
分类号:R739.4(神经系肿瘤)
资助基金:国家自然科学基金(30901535)上海交通大学医学院新百人计划(10XBR01)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 14-17 )
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