不同缺氧条件对小鼠骨髓基质细胞成分组成和细胞分化的影响
任红英
赵钦军
王彤
程雪莲
程涛
1.中国医学科学院血液学研究所，实验血液学国家重点实验室，天津3000202.中国医学科学院血液学研究所，实验血液学国家重点实验室，天津3000203.中国医学科学院血液学研究所，实验血液学国家重点实验室，天津3000204.中国医学科学院血液学研究所，实验血液学国家重点实验室，天津3000205.中国医学科学院血液学研究所，实验血液学国家重点实验室，天津300020
摘要：目的：观察不同缺氧条件对小鼠骨髓基质细胞（ BMSC）成分组成的影响。方法 Balb／c小鼠15只脱颈处死，取双侧股骨，分离BMSC接种于T25培养瓶中。将细胞随机分为对照组、缺氧1组、缺氧2组、氯化钴组。各组细胞分别以低密度（5×102／cm2）、中密度（1×104／cm2）、高密度（1．5×106／cm2）接种于培养基。对照组置于常氧条件（37℃、5％CO2、21％O2）培养，缺氧1组于2．5％～4％O2、5％CO2、91％～92．8％N2条件下培养，缺氧2组置于7％～8％O2、5％CO2、87％～88％N2条件下培养。氯化钴组在培养基中加入氯化钴100μΜ／L。各组细胞培养7 d后观察结果。光镜及透射电镜下观察BMSC细胞形态和超微结构变化，免疫组化法检测细胞中碱性磷酸酶（ALP）表达，RT-PCR法检测OCT4及内皮细胞相关基因（VEGF、FLT-1、FLK-1）表达。结果对照组以梭形成纤维样细胞为主，少有细胞融合现象；缺氧1、2组出现较多个体较大、扁平而宽阔的骰子样细胞；氯化钴组细胞呈圆形，个体较小。缺氧1组BMSC增殖率高于缺氧2组；中密度接种细胞增殖率最高；氯化钴组细胞增殖受到明显抑制。缺氧1、2组ALP染色阳性细胞多于对照组及氯化钴组，且缺氧1组高于缺氧2组（ P均＜0．05）。缺氧1、2组OCT4基因表达受到抑制，仅对照组及氯化钴组OCT4基因表达阳性。 VEGF在缺氧1、2组表达均为阴性，而在氯化钴组表达阳性；各组FLK-1基因表达均为阳性；FLT-1基因表达均为阴性。结论在2．5％～4％O2、1×104／cm2接种密度条件下，小鼠BMSC中一种分化程度较高、宽阔、扁平、ALP表达阳性的细胞比例进一步增高。
关键词：缺氧骨髓基质细胞细胞分化
分类号：Q813(细胞工程)
资助基金：国家自然科学基金(81000196)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 20-23 )
英文信息