稳定高表达 CYP2 E1基因肝癌HepG2细胞系的构建
熊永福1
闫再华1
杨召1
李敬东2
1.川北医学院,四川南充,6370072.川北医学院附属医院
摘要：目的：构建稳定高表达CYP2E1基因的肝癌HepG2细胞系。方法通过NCBI查询CYP2E1的编码序列，设计并构建表达质粒pLV（Exp）-Puro-CMVm-CYP2E1，用载体对应的慢病毒包装质粒（pMDLg／pRRE、pRSV-REV和pMD2．G）共同转染293T细胞。利用携带CYP2E1基因的慢病毒（Lenti-CYP2E1-eGFP-Puro）感染HepG2细胞系，采用嘌呤霉素抗性筛选方法构建高表达CYP2 E1肝癌HepG2细胞系。增强绿色荧光蛋白检测转染情况，荧光定量PCR及Western blotting检测HepG2、空载及转染CYP2E1基因的HepG2细胞系中CYP2E1 mRNA和蛋白。结果 HepG2细胞系均成功转染CYP2E1基因。 HepG2、空载及转染CYP2E1基因的HepG2细胞系中CYP2E1 mRNA相对表达量分别为1．02±0．06、1．06±0．05、7．42±0．07，蛋白相对表达量分别为0．26±0．02、0．29±0．01、1．61±0．08，转染CYP2E1基因的HepG2细胞系与前两者比较，P均＜0．05。结论通过慢病毒转染成功构建了稳定高表达CYP2 E1基因的肝癌HepG2细胞系。
关键词：CYP2 E1基因慢病毒载体肝癌HepG2细胞
分类号：R73(肿瘤学)
资助基金：国家自然科学基金(81370531)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 8-10 )
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