人Ⅱ型大麻受体真核表达体系构建及其在 HEK293细胞中的表达
孙厚良
李晶
龙明
封玉玲
1.重庆三峡医药高等专科学校,重庆万州,4041202.重庆三峡医药高等专科学校,重庆万州,4041203.重庆三峡医药高等专科学校,重庆万州,4041204.重庆三峡医药高等专科学校,重庆万州,404120
摘要：目的：构建人Ⅱ型大麻受体（ hCB2）基因GV230真核表达质粒，并检测hCB2基因在HEK293细胞中的表达。方法利用人脑皮质细胞的总RNA为模板，RT-PCR获得cDNA，通过酶切、连接及测序鉴定正确后，再将目的片段插入真核表达载体GV230，构建重组表达质粒GV230-hCB2，阳性克隆用脂质体瞬时转染HEK293细胞。激光共聚焦扫描显微镜和Western blotting法检测hCB2基因表达产物在细胞的表达情况。结果扩增出hCB2基因片段，成功构建了重组表达质粒，并检测到目的蛋白在转染细胞中表达，观察到hCB2受体在胞膜分布和表达。结论成功构建GV230-hCB2质粒，该质粒在HEK293细胞中能表达hCB2蛋白，此为进一步研究hCB2生物学功能奠定了实验基础。
关键词：Ⅱ型大麻受体基因克隆真核表达
分类号：R394(医学遗传学)
资助基金：重庆市基础与前沿研究计划项目( cstc2014 jcyjA10049)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 14-16 )
英文信息