非必需氨基酸和β-巯基乙醇对神经干细胞增殖的影响
王娓娓1
鲍天昊2
张红苗1
王淑芬3
肖志成3
韩剑虹1
1.昆明医科大学第二附属医院,昆明,6501012.昆明医科大学第二附属医院,昆明650101; 昆明医科大学附属精神卫生中心3.昆明医科大学
摘要:目的:观察非必需氨基酸(NEAA)和β-巯基乙醇对神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法取孕龄为14.5 d的雌鼠,处死后提取NSCs并培养,取5~7代的NSCs用于实验,将NSCs细胞使用传代培养基培养,并分为四组,对照组:加入磷酸盐缓冲液( PBS)12μL;NEAA组:加入NEAA 10μL,PBS 2μL;β-巯基乙醇组:加入β-巯基乙醇2μL, PBS 10μL;NEAA+β-巯基乙醇组:加入NEAA 10μL,β-巯基乙醇2μL。通过细胞计数法计算NSCs的增殖速度,噻唑蓝( MTT)法测定NSCs增殖率,RT-PCR法测定NSCs中凋亡相关基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的表达,免疫组化法对NSCs进行鉴定并测定NSCs向神经元和星形胶质细胞的分化潜能。结果与对照组比较,NEAA组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA降低( P<0.05或<0.01);β-巯基乙醇组及NEAA+β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA、TUJ-1阳性细胞百分比、GFAP阳性细胞百分比降低,Nestin升高(P<0.05或<0.01)。与NEAA组比较,NEAA+β-巯基乙醇组各项指标差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01);与β-巯基乙醇组比较,NEAA +β-巯基乙醇组 NSCs 增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA降低(P<0.05或<0.01)。结论 NEAA和β-巯基乙醇均能促进NSCs增殖,联合使用起协同作用。
关键词:神经干细胞非必需氨基酸β-巯基乙醇增殖分化
分类号:R329.2(人体形态学)
资助基金:国家自然科学基金(31460314)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 21-23 )
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山东医药

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ISSN:1002-266X
年,卷(期):2016,(1)
所属栏目:论著