miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用及其分子机制
庄彪
闵志均
王延峰
张鹏
倪熊
瞿惠龙
丁育明
1.上海市浦东医院,上海,2013992.上海市浦东医院,上海,2013993.上海市浦东医院,上海,2013994.上海市浦东医院,上海,2013995.上海市浦东医院,上海,2013996.上海市浦东医院,上海,2013997.上海市浦东医院,上海,201399
摘要:目的 探讨miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用,并验证其靶点蛋白. 方法 传代培养人结肠癌细胞株HCT-116,分别采用空病毒载体( pRI-CMV-GFP)转染(阴性对照组)、慢病毒载体( pRI-CMV-GFP-miRNA-34a)转染(慢病毒组),另选未经任何处理的HCT-116细胞作为空白对照组. 采用Real-time PCR法检测miR-34a的相对表达量,采用MTT实验、Transwell 小室法检测HCT-116 细胞增殖和迁移能力,采用细胞免疫荧光试验和Western blotting法验证其靶点蛋白. 结果 以空白对照组miR-34a表达为1,阴性对照组为1.03 ±0.09,慢病毒组为6.41 ±1.56,慢病毒组高于阴性对照组及空白对照组(P均<0.01),证实慢病毒转染成功. 与空白对照组、阴性对照组比较,慢病毒组细胞增殖和迁移能力显著下降(P均<0.01). 细胞免疫荧光试验显示,慢病毒组细胞c-Met的荧光强度显著降低,而空白对照组与阴性对照组无明显变化. Western blotting 结果显示,慢病毒组c-Met及磷酸化c-Met表达均低于阴性对照组、空白对照组(P均<0.01). 结论 过表达miR-34a可抑制结肠癌细胞增殖及迁移,并下调靶点蛋白c-Met及磷酸化c-Met表达,提示miR-34a可作为结肠癌治疗的分子靶点.
关键词:结肠癌miR-34a细胞增殖细胞迁移c-Met
分类号:R735.3(消化系肿瘤)
资助基金:上海市浦东新区卫生和计划生育委员会卫生科技项目(PW2014A-28)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 14-16,后插1 )
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