Eps8抗原改造表位 HLA-A*0201限制性抗肿瘤能力观察
姜春俊
周炜均
谢晓灵
杜静文
张宏毫
贺艳杰
李玉华
1.南方医科大学珠江医院,广州,5102822.南方医科大学珠江医院,广州,5102823.南方医科大学珠江医院,广州,5102824.南方医科大学珠江医院,广州,5102825.南方医科大学珠江医院,广州,5102826.南方医科大学珠江医院,广州,5102827.南方医科大学珠江医院,广州,510282
摘要：目的：观察人表皮生长因子受体通路底物8（Eps8）抗原改造表位是否有人白细胞抗原A（HLA-A）*0201限制性抗肿瘤能力。方法替换 Eps8抗原锚定位点氨基酸获得改造肽，用 BIMAS、SYFPEITHI 在线数据库及 Aotodock 4．2软件预测改造表位与 HLA-A*0201分子的结合力，筛选出稳定结合的改造表位 E1-9V（ILDDIEF-FV）、E1-1Y9V（YLDDIEFFV）。用经典肽结合力实验检测各改造表位与 HLA-A*0201分子的亲和力。制备天然表位（E1）、E1-9V、E1-1Y9V 特异性杀伤性 T 淋巴细胞（CTLs）。用乳酸脱氢酶（LDH）释放试验检测并比较 E1-9V、E1-1Y9V 特异性 CTLs 对 MCF-7细胞、沉默 Eps8的 MCF-7细胞（MCF-7／shRNA）和抗 HLA-A2抗体预孵育的 MCF-7细胞（MCF-7／A2Ab）的杀伤率，E1-9V、E1-1Y9V 特异性 CTLs 对 SW480、U251、K562、IM-9细胞的杀伤率，E1、E1-9V、E1-1Y9V 特异性 CTLs 对 T2细胞的杀伤率。结果 E1-9V、E1-1Y9V 均可与 HLA-A*0201分子 B、F 对接口袋的氨基酸形成稳定氢键。肽结合力实验结果显示 E1-9V、E1-1Y9V 与 HLA-A*0201均具有高亲和力，且高于天然表位 E1，P 均＜0．05。E1-9V、E1-1Y9V 特异性 CTLs 对 MCF-7／shRNA、MCF-7／A2Ab 细胞杀伤率明显低于 MCF-7细胞，P 均＜0．05。E1-9V、E1-1Y9V 特异性 CTLs 对 SW480、U251细胞杀伤率明显高于 K562、IM-9细胞（P 均＜0．05）。E1-1Y9V 特异性 CTLs 对 T2细胞的杀伤率显著高于 E1、E1-9V 特异性 CTLs，P 均＜0．05。结论 Eps8抗原改造表位 E1-9V、E1-1Y9V 与天然表位 E1相比具有更高的 HLA-A*0201分子亲和力，保留了原有的免疫原性，并且 E1-1Y9V 抗肿瘤免疫效应强于天然表位 E1。
关键词：表皮生长因子受体通路底物8抗原改造改造表位细胞毒性T淋巴细胞肿瘤疫苗人白细胞抗原A*0201
分类号：R394(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(81372249)国家自然科学基金(81300431)广东省-中国科学院全面战略合作专项(2013B091500072)广东省高等教育创新强校工程专项基金资助项目(2014GKXM029)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
英文信息