人Arresten基因真核表达质粒的构建
曹凯1
孟庆义2
王瑞华2
刘兆轩2
王荣飞2
1.潍坊医学院,山东潍坊,2610532.山东大学附属济南市中心医院
摘要：目的 构建人Arresten基因的真核表达质粒.方法 设计人Arresten基因引物序列,取100 mg新鲜的胎盘组织提取总RNA,采用RT-PCR法扩增Arresten基因.将获取的Arresten基因片段和pIRES2-EGFP质粒分别用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ作双酶切,将酶切产物与质粒连接,转化感受态大肠杆菌DH-5α进行真核表达.采用酶切、菌液PCR及测序的方法检测Arresten基因真核表达质粒构建的正确性.结果 经双酶切鉴定,得到1条约700 bp的片段和1条与pIRES2-EGFP空载体(5.3 kb)相近的片段,符合Arresten基因重组质粒大小.经重组质粒的菌液PCR鉴定,7组菌液均扩增出700 bp大小的扩增片段,均为阳性克隆.测序结果示,Arresten基因mRNA与GenBank中人Arresten序列完全一致.结论 成功构建了人Arresten基因的真核表达质粒.
关键词：Arresten基因表皮生长因子受体质粒真核酶切血管狭窄
分类号：R318.0(医用一般科学)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 25-27 )
英文信息