10% EDTA、5%硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理的效果对比观察
卓洋
王巧
杨聪颖
陈昊
李爱民
1.徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港,2220002.徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港,2220003.徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港,2220004.徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港,2220005.徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港,222000
摘要:目的 观察并比较10%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)和5%硝酸脱钙处理大鼠颞骨的效果.方法 SD大鼠10只,随机分为EDTA组和硝酸组,取出大鼠颞骨后分别置于10% EDTA、5%硝酸脱钙液中进行脱钙处理.观察两组脱钙效果,记录脱钙时间,采用甲苯胺蓝染色进行颞骨组织形态学观察,采用免疫荧光双标染色检测α-tubulin蛋白、水通道蛋白1(AQPl).结果 两组取材过程中,颅骨硬度适当,颞骨可轻松切下,无砂砾感,切下的颞骨无松散及组织脱落.硝酸组脱钙所需时间分别为(11.20±0.83)d、(26.20 ±2.38) min,两组相比,P<0.05.EDTA组颞骨整体形态保持完好,蜗管、镫骨肌、岩动脉、神经元、雪旺细胞、郎飞结、神经干可清晰辨识;硝酸组颞骨整体结构保存较理想,神经元形态保持尚可,但存在骨质染色不均、雪旺细胞崩解、轴突肿胀、郎飞结消失现象.EDTA组颞骨脱钙后AQP1、α-tubulin蛋白定位准确,组织区分度高;硝酸组由于细胞膜中AQP1遭受破坏、位于微管内的α-tubulin蛋白漏出细胞,荧光消减明显,组织形态保持较差.结论 10% EDTA和5%硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理效果均较好,两种脱钙液均适用于普通病理及结构观察,若用于蛋白定量及定性方面研究,应首选10% EDTA.
关键词:骨脱钙技术乙二胺四乙酸二钠硝酸颞骨
分类号:R446.6(诊断学)
资助基金:江苏省卫生厅重大项目(H201259)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 43-45 )
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山东医药

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ISSN:1002-266X
年,卷(期):2016,56(31)
所属栏目:基础研究