结直肠癌患者外周血 LAP ＋CD4＋调节性T 细胞的分离纯化及功能鉴定
阳祖庆
江志远
钟武
王时俊
曹云飞
1.广西医科大学第一附属医院,南宁,5300212.广西医科大学第一附属医院,南宁,5300213.广西医科大学第一附属医院,南宁,5300214.广西医科大学第一附属医院,南宁,5300215.广西医科大学第一附属医院,南宁,530021
摘要：目的：应用免疫磁珠分选法分离纯化结直肠癌患者外周血中 LAP ＋CD4＋调节性 T 细胞（LAP ＋CD4＋T），并对分选获得的目的细胞进行体外功能的初步研究。方法按照免疫磁珠两步法（阴性分选和阳性分选）分离结直肠癌患者外周血单个核细胞中的 LAP ＋CD4＋T 细胞，流式细胞术（FACS）检测分选后细胞的纯度；台盼蓝染色检测细胞存活率；CCK-8掺入法检测其对 LAP －CD4＋T 细胞的增殖抑制效应；ELISA 法检测体外细胞因子 TGF-β和IL-10表达。结果经免疫磁珠法分选获得的 LAP ＋CD4＋T 细胞纯度为（95．16±2．11）％，台盼蓝染色细胞存活率为（93．64±1．33）％。CCK-8掺入法检测结果显示 LAP ＋CD4＋T 细胞干预后 LAP －CD4＋T 细胞生长明显受到抑制（P ＝0．000）；ELISA 结果显示 LAP ＋CD4＋T 细胞较 LAP －CD4＋T 细胞分泌更高浓度的细胞抑制因子 TGF-β和 IL-10（P ＝0．000）。结论免疫磁珠法分选结直肠患者外周血中 LAP ＋CD4＋T 细胞具有高效、快捷、纯度高等优点，且不损伤细胞活性。
关键词：结直肠癌免疫磁珠法LAP+CD4+调节性 T 细胞
分类号：R735.3(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金资助项目(81250316)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 26-29 )
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