血清载脂蛋白B椭偏光蛋白质芯片技术定量检测的条件优化
宁翔1
王娇娇2
王娟1
毕少杰1
盛林1
1.山东大学第二医院,济南,2500332.山东大学齐鲁医院
摘要：目的：优化椭偏光蛋白芯片技术定量检测血清载脂蛋白B（ApoB）的条件，并观察最佳条件下椭偏光蛋白芯片技术定量检测血清ApoB的准确性。方法用椭偏光蛋白芯片技术检测含有0．2、0．3、0．4、0．5、0．6 mg／mL的载脂蛋白B抗体（anti ApoB）和200μg／mL ApoB标准品的溶液，测得灰度值最高者选为最佳anti-ApoB浓度。用椭偏光蛋白芯片技术检测5、10、20、50、100、200μg／mL ApoB标准品溶液，anti- ApoB浓度为0．3 mg／mL，结果以灰度值表示。然后在上述标准品溶液中加入蛋白G使其终浓度为0．1 mg／mL，再检测一次灰度值。比较两次检测的灰度值，确定是否应该加入0．1 mg／mL蛋白G。最佳条件下椭偏光蛋白芯片技术检测0、5、10、20、50、100、200μg／mL ApoB标准品溶液，计算上述ApoB标准品溶液灰度值与不含ApoB的空白探针溶液（含anti ApoB和蛋白G）灰度值的差值。对上述ApoB标准品溶液浓度和灰度值差值的相关性进行分析，以ApoB标准品溶液浓度为横坐标，灰度值差值为纵坐标描画标准曲线并建立方程。最佳条件下用椭偏光蛋白芯片技术检测16份40倍稀释的已知ApoB浓度（采用免疫比浊法测定）血清的灰度值两次。用上述方程计算16份血清中ApoB浓度，并与其实际ApoB浓度比较。结果最佳anti-ApoB浓度为0．3 mg／mL。与不应用蛋白G者相比，应用0．1 mg／mL蛋白G的椭偏光蛋白芯片技术测得样品的灰度值高（P均＜0．05）。以ApoB浓度为横坐标x、灰度差值为纵坐标y描画标准曲线， Maple9．5软件得出的回归方程为：y＝－23．116Ln（1－x／60），R2＝0．9364。16份血清ApoB浓度和第一次、第二次用椭偏光蛋白芯片技术检测测得血清ApoB浓度相比P均＞0．05。结论椭偏光蛋白芯片技术检测血清ApoB的最佳条件为anti-ApoB浓度0．3 mg／mL，蛋白G浓度0．1 mg／mL。此条件下椭偏光蛋白芯片技术检测血清ApoB结果准确。
关键词：椭偏光蛋白芯片技术光学蛋白质芯片椭偏光生物显微成像技术载脂蛋白B载脂蛋白B抗体蛋白G
分类号：R446.11(诊断学)
资助基金：国家自然科学基金(81500232)山东省医药卫生科技发展计划(2014WS0155)山东省自然科学基金(2014ZRE27456)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 17-20 )
英文信息