SENP1基因沉默的人Ⅱ型肺泡上皮细胞系构建
赵许
董文斌
雷小平
李清平
康兰
赵帅
张婵
1.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460002.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460003.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460004.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460005.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460006.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460007.西南医科大学附属医院,四川泸州,646000
摘要：目的：构建稳定沉默 SUMO 特异性蛋白酶1（SENP1）基因的人Ⅱ型肺泡上皮细胞系 HEPApiC。方法构建沉默 SENP1基因的 LV3-SENP1-RNAi 慢病毒载体。将 HEPApiC 细胞分为实验组、对照组、空载组，实验组感染LV3-SENP1-RNAi，空载组感染空载体，对照组不做特殊处理；感染72 h 后观察绿色荧光强度，采用 qRT-PCR 检测HEPApiC 细胞中的 SENP1 mRNA，采用 Western blotting 法检测 SENP1蛋白。结果经酶切鉴定及测序分析，成功构建 LV3-SENP1-RNAi 慢病毒载体质粒，包装后得到高滴度的病毒颗粒。感染 LV3-SENP1-RNAi 的 HEPApiC 细胞中 GFP 表达随时间延长逐渐增强，说明 LV3-SENP1-RNAi 成功感染 HEPApiC 细胞。实验组、对照组、空载组细胞中SENP1 mRNA 相对表达量分别为0．026、0．050、0．057，SENP1蛋白相对表达量分别为0．161±0．015、0．781±0．046、0．811±0．008；实验组 SENP1 mRNA 及蛋白相对表达量降低，与对照组及空载组相比，P 均＜0．05。结论成功构建了稳定沉默 SENP1基因的 HEPApiC 细胞系。
关键词：小泛素相关修饰蛋白质类人Ⅱ型肺泡上皮细胞基因沉默RNA 干扰
分类号：R722.19(新生儿、早产儿疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81571480)四川省科技厅科研项目(2014NZ0014)泸州市政府-泸州医学院联合专项(2013LZLY-J08)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 16-19 )
英文信息