人 Tudor-SN UTR 片段荧光素酶报告基因表达质粒的构建及活性检测
赵亚丽
苏超
甘世虎
任媛媛
高星杰
杨洁
何津岩
1.天津医科大学,天津,3000702.天津医科大学,天津,3000703.天津医科大学,天津,3000704.天津医科大学,天津,3000705.天津医科大学,天津,3000706.天津医科大学,天津,3000707.天津医科大学,天津,300070
摘要:目的:为深入研究Tudor-SN蛋白本身在翻译水平的调控机制奠定基础。方法以HeLa细胞全基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因,利用双酶切的方法将目的片段连接到pGL3-Control载体上。再将构建成功的pGL3-5′UTR、pGL3-3′UTR重组质粒分别与内参海肾荧光素酶质粒瞬时共转染HeLa细胞,培养48 h检测荧光素酶的活性。结果双酶切和基因测序法鉴定重组质粒构建成功,转染重组质粒后可检测到荧光素酶的活性;以pGL3-5′UTR质粒荧光素酶活性最高。结论成功构建了人Tudor-SN基因5′UTR和3′UTR序列的重组质粒,为研究Tu-dor-SN基因UTR区对翻译调控的影响奠定了基础。
关键词:人Tudor-SN蛋白5′UTR3′UTR重组质粒荧光素酶
分类号:Q591.2(物质代谢及能量代谢)Q784(基因工程(遗传工程))
资助基金:国家自然科学基金(31125012)教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT13085)国家自然科学基金(31170830/31370749/31571380)天津市应用基础与前沿技术研究计划(15JCQNJC09900)天津医科大学青年基金(2015KYZQ03)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1-4 )
英文信息
