腹腔注射雷帕霉素的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脊髓神经元病理变化及其机制
谢阳
黄远帅
杨元
李作孝
1.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460002.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460003.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460004.西南医科大学附属医院,四川泸州,646000
摘要：目的 观察腹腔注射雷帕霉素的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脊髓神经元病理变化,并探讨其机制.方法 将45只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和观察组,各15只.对照组不作任何处理.模型组和观察组制备EAE模型.观察组小鼠腹腔注射雷帕霉素0.75 mg/(kg·d),2 d后再注射百日咳菌稀释液0.5 mL,满18 d后处死.取脊髓组织行尼氏染色,光镜下观察病理变化.采用DCF化学荧光法检测脊髓组织匀浆活性氧簇(ROS)水平. 采用Western blotting法检测各组小鼠自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Akt/mTOR/P70s6k信号通路蛋白p-Akt、p-mTOR.结果 光镜下观察模型组小鼠脊髓神经元尼氏小体体积变小、数量减少及颜色变浅,排列松散,胞体与轴突轮廓模糊.与模型组相比,观察组小鼠脊髓神经元内排列较整齐,尼氏小体数量及体积均增多,胞体与轴突轮廓模糊现象少见.对照组、模型组、观察组小鼠脊髓组织匀浆ROS含量分别为(43.34±2.67)、(84.22±3.15)、(64.10±3.59)U/mgprot.模型组小鼠脊髓组织匀浆ROS含量高于对照组(P<0.05);观察组小鼠脊髓组织匀浆ROS含量高于对照组(P<0.05),低于模型组(P<0.05).对照组、模型组、观察组小鼠脊髓组织自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ条带光密度值分别为0.486±0.021、0.251±0.032、0.566±0.054.小鼠脊髓组织自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ条带光密度值观察组高于模型组,模型组低于对照组,P均<0.05.模型组小鼠小鼠脊髓组织p-Akt、p-mTOR条带光密度值高于对照组,P均<0.05;观察组小鼠小鼠脊髓组织p-Akt、p-mTOR条带光密度值低于对照组和模型组,P均<0.05.结论 腹腔注射雷帕霉素的EAE小鼠脊髓神经元病理变化程度减轻.这可能是由于雷帕霉素可抑制AKT/mTOR/P70s6k通路激活自噬活性,清除ROS抑制氧化应激.
关键词：雷帕霉素实验性自身免疫性脑脊髓炎细胞自噬氧化应激PI3K-AKT-mTOR通路
分类号：R744.5(神经病学与精神病学)
资助基金：四川省卫生厅科研项目(120336)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 26-29 )
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