慢病毒介导RNA干扰HES1鼻咽癌稳定细胞株的建立与鉴定
程玉霜
王慧艳
肖东
1.南方医科大学肿瘤研究所,广州,5105152.南方医科大学肿瘤研究所,广州,5105153.南方医科大学肿瘤研究所,广州,510515
摘要：目的 建立稳定干扰Split多毛增强子1(HES1)的鼻咽癌(NPC)细胞株,为进一步探讨HES1对NPC的影响奠定基础.方法 将293T细胞接种6孔板后随机分为A、B、C、D、E组,分别瞬时转染慢病毒质粒shHES1-a、shHES1-b、shHES1-c、shHES1-d及空载质粒shSCR,分别用qRT-PCR和Western blot法检测HES1 mRNA及蛋白,筛选出最有效干扰质粒;将最有效干扰质粒或空载质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,获得含最有效干扰质粒或空载质粒的病毒上清(LV-shHES1/LV-shSCR).将NPC细胞CNE2和S18随机分为观察组和对照组,分别将LV-shHES1、LV-shSCR以浓度梯度方式感染细胞,分别采用qRT-PCR和Western blot法检测HES1 mRNA及蛋白.结果 C组293T细胞中HES1 mRNA及蛋白相对表达量均低于其余各组(P均<0.05).与对照组比较,观察组CNE2和S18细胞中HES1 mRNA及蛋白相对表达量均降低(P均<0.05).结论 成功建立稳定干扰HES1的NPC细胞株.
关键词：鼻咽癌Split多毛增强子1RNA干扰慢病毒载体NPC细胞株
分类号：R739.62(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81172587)国家自然科学基金(81372896)国家自然科学基金(81672689)广东省自然科学基金(2014A030313294)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 9-11 )
英文信息