对头颈鳞状细胞癌中高表达基质金属蛋白酶基因具有激活作用的人类膜蛋白基因筛选
许洪波
米光熙
黄俊伟
刘泽阳
尹高菲
黄志刚
1.首都医科大学附属北京同仁医院,北京,1007302.首都医科大学附属北京同仁医院,北京,1007303.首都医科大学附属北京同仁医院,北京,1007304.首都医科大学附属北京同仁医院,北京,1007305.首都医科大学附属北京同仁医院,北京,1007306.首都医科大学附属北京同仁医院,北京,100730
摘要：目的 对头颈部鳞状细胞癌中高表达的基质金属蛋白酶(MMP)基因(包括MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12 和 MMP13)具有激活作用的人类膜蛋白基因进行筛选.方法 构建上述7个备选MMP启动子报告基因质粒.用豆蔻酸佛波酰乙酯(PMA,一种蛋白激酶C激活剂)刺激7个备选MMP启动子报告基因质粒.用双荧光素酶检测系统检测各备选MMP启动子报告基因质粒PMA刺激前的活性及PMA刺激后的活性,以后者除以前者得出各备选MMP启动子报告基因质粒的相对荧光素酶活性值(RLA),RLA最大者选定为MMP启动子报告基因质粒.用人类膜蛋白基因质粒库中的722种质粒依次刺激MMP启动子报告基因质粒,刺激前后MMP启动子报告基因质粒RLA均数超过10确定为对MMP启动子报告基因质粒活性有明显激活作用的人类膜蛋白基因质粒.将筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第二轮筛选,第二轮筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第三轮筛选,最终确定对头颈部鳞状细胞癌中高表达的MMP有激活作用的人类膜蛋白基因.结果 PMA刺激后MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12、MMP13启动子报告基因质粒的RLA分别为4.53±0.72、1.47±0.28、23.28±1.96、2.37±0.46、8.81±1.35、2.15±0.51、3.47±0.99.MMP3启动子报告基因质粒的RLA明显高于其他MMP启动子报告基因质粒(P均<0.05),被选为MMP启动子报告基因质粒.全部722个质粒经3轮筛选,确定AXL受体酪氨酸激酶(AXL) 、肿瘤坏死因子受体超家族成员 10b(TNFRSF10B)和G蛋白耦联 受体65(GPR65)质粒对MMP启动子报告基因质粒均有明显的激活作用.结论 GPR65、 AXL、TNFRSF10B基因对头颈部鳞状细胞癌中高表达的MMP基因有激活作用.
关键词：头颈部鳞状细胞癌基质金属蛋白酶人类膜蛋白G蛋白耦联受体65AXL受体酪氨酸激酶肿瘤坏死因子受体超家族成员10b
分类号：R739.91(其他部位肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81670946)北京市医院管理局临床医学发展专项(XMLX201507)首都医科大学附属北京同仁医院科研骨干基金(2015-YJJ-GGL-002)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1-3 )
英文信息