转染CDK2-shRNA对黑色素瘤B16-F1细胞达巴卡嗪敏感性的影响及其机制
晋佳路1
朱仁书1
谢育媛2
刘红春3
1.鹤壁职业技术学院医学院,河南鹤壁,4580302.湖北省食品药品监督检验研究院3.郑州大学第一附属医院
摘要：目的 探讨转染周期素依赖性蛋白激酶2短发夹RNA(CDK2-shRNA)对黑色素瘤B16-F1细胞达巴卡嗪敏感性的影响及其机制.方法 将黑色素瘤B16-F1细胞分为观察组、空质粒组和对照组,观察组转染重组慢病毒pUL-CDK2-shRNA质粒,空质粒组转染重组慢病毒pUL-NC-shRNA质粒,对照组不转染.转染12 h后用250 μmol/L的达巴卡嗪孵育三组细胞72 h.采用MTT法检测三组细胞吸光度值,采用集落形成实验检测三组细胞集落形成率(CFR),采用AnnexinV-FITC/ PI 双染法检测三组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测三组细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白相对表达量,计算Bax/Bcl-2.结果 观察组、空质粒组和对照组细胞吸光度值分别为0.221±0.019、0.684±0.049、0.699±0.051.观察组细胞吸光度值与空质粒组和对照组相比,P均< 0.05 .观察组、空质粒组和对照组细胞CFR分别为33.00%±1.80%、67.50%±7.26%、69.83%±5.25%.观察组细胞CFR与空质粒组和对照组相比,P均<0.05 .观察组、空质粒组和对照组细胞凋亡率分别为43.6%±4.1%、17.6%±3.8%、15.1%±4.0%.观察组细胞凋亡率与空质粒组和对照组相比,P均<0.05 .观察组、空质粒组和对照组细胞Bax/Bcl-2分别为2.56±0.28、0.84±0.04、0.86±0.11,Caspase-3相对表达量分别为0.92±0.07、0.69±0.08、0.57±0.05.观察组细胞Bax/Bcl-2、Caspase-3相对表达量与空质粒组和对照组相比,P均< 0.05 .结论 转染CDK2-shRNA可以提高黑色素瘤B16-F1细胞对达巴卡嗪的敏感性.其机制是转染CDK2-shRNA可以提高达巴卡嗪共培养的黑色素瘤B16-F1细胞Bax/Bcl-2和Caspase-3表达水平,促进其凋亡.
关键词：黑色素瘤周期素依赖性蛋白激酶2短发夹RNA达卡巴嗪药物疗法耐药性细胞凋亡
分类号：R733(造血器及淋巴系肿瘤)
资助基金：河南省科技计划(122300410193)河南省高等学校青年骨干教师资助计划(2011GGJS-262)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 8-11 )
英文信息