托吡酯腹腔注射后癫痫大鼠海马组织损伤变化及其机制探讨
李香丹1
尹明姬1
杨洋2
林贞花2
咸哲民1
李今子1
1.延边大学附属医院,吉林延吉,1330022.延边大学
摘要：目的 观察托吡酯(TPM)腹腔注射后癫痫大鼠海马组织损伤改变,并探讨其可能机制.方法 将40只大鼠依据随机数字表法分为正常组、模型组、TPM低剂量组、TPM高剂量组.模型组、TPM低剂量组、TPM高剂量组采用腹腔注射氯化锂180 mg/kg、匹罗卡品30 mg/kg制作癫痫模型.模型组、TPM低剂量组、TPM高剂量组大鼠分别于癫痫发作后5 h经腹腔注射生理盐水10 mL/(kg·d)、TPM 40 mg/(kg·d)、TPM 80 mg/(kg·d).各组连续用药4周后处死大鼠取海马组织,HE染色观察大鼠海马组织病理变化;应用基因芯片技术筛选各组差异表达的miRNA,并用实时荧光定量PCR法进行验证;采用TUNEL法检测海马组织凋亡细胞,并计算凋亡细胞数;分别采用Western blotting法、免疫荧光法和免疫组化法检测各组大鼠海马组织中的Caspase-8.结果 与正常组相比,模型组海马组织损伤明显,TPM低剂量组和TPM高剂量组海马组织损伤较模型组减轻,且TPM低剂量组损伤最轻.基因芯片检测发现模型组出现12个表达上调的miRNA和14个表达下调的miRNA,经实时荧光定量PCR验证,只有miR-146a在各组表达的差异有统计学意义.模型组、TPM高剂量组、TPM低剂量组、正常组海马组织中miR-146a相对表达量依次降低(P均<0.05).细胞凋亡检测发现,与正常组相比,模型组大鼠CA1区、CA3区和DG区凋亡细胞细胞数高于正常组(P均<0.05),而TPM高剂量组和TPM低剂量组凋亡细胞数低于模型组(P均<0.05).Western blotting结果显示,模型组Caspase-8蛋白相对表达量高于正常组,模型组、TPM高剂量组、TPM低剂量组Caspase-8蛋白相对表达量依次降低(P均<0.01).免疫荧光结果显示,与正常组相比,模型组大鼠CA1区、CA3区和DG区Caspase-8阳性细胞数高于正常组(P均<0.05),TPM高剂量组和TPM低剂量组Caspase-8阳性细胞数低于模型组(P均<0.05).免疫组化结果显示,模型组IOD值高于正常组,模型组、TPM高剂量组、TPM低剂量组IOD值依次降低(P均<0.05).结论 TPM腹腔注射可减轻癫痫大鼠海马组织病理改变,减少海马组织细胞凋亡,下调海马组织中miR-146a和Caspase-8的表达,其中40 mg/(kg·d)的TPM较80 mg/(kg·d)效果更加明显.TPM的抗癫痫作用机制可能与调节miRNA表达、减少细胞凋亡、下调Caspase-8表达有关.
关键词：癫痫托吡酯海马微小RNA微小RNA146a细胞凋亡含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶8
分类号：R742.1(神经病学与精神病学)
资助基金：吉林省医药卫生科研计划项目(C2017103)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 14-18 )
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