小干扰RNA与反义寡核苷酸技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果比较
张玉峰1
叶坤英1
钟丹2
1.河南中医药大学第二临床医学院,郑州,4500022.井冈山大学医学院
摘要:目的 对比观察小干扰RNA(siRNA)和反义寡核苷酸(ASODN)技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果.方法 将培养的大鼠肝星状细胞株HSC-T6随机分为siRNA组和ASODN组,两组又分别分为A、B、C、D各4个亚组;siRNA组和ASODN组中的A亚组不转染质粒, C、D、B亚组分别采用siRNA、ASODN技术转染大鼠RhoA特异性Rat1 、Rat2质粒及HK-A阴性对照质粒.转染48 h取各组细胞,以RT-PCR技术检测细胞中的RhoA、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) mRNA,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中的透明质酸(HA)及层粘连蛋白(LN).结果 siRNA组与ASODN组中RhoA、Col Ⅰ mRNA均以C亚组表达量最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组RhoA、Col Ⅰ mRNA相对表达量低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).siRNA组与ASODN组细胞上清液HA、LN水平均以C亚组最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组细胞上清液HA、LN水平低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 siRNA和ASODN均可抑制大鼠HSC-T6细胞的RhoA表达,但siRNA下Rat1质粒所介导的 RNA干扰技术相对于ASODN能更有效抑制HSC-T6细胞外基质HA、Col Ⅰ、LN的生成.
关键词:小干扰RNA反义寡核苷酸RhoA透明质酸Ⅰ型胶原层粘连蛋白肝星状细胞
分类号:R365(病理学)Q522(核酸)
资助基金:河南省中医药科学研究专项(2014ZY02027)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 5-8 )
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山东医药

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ISSN:1002-266X
年,卷(期):2017,57(34)
所属栏目:论著