IKCa1通道对HeLa细胞迁移、侵袭及miRNA表达谱的影响
程慧
高兰阳
詹平
毛熙光
1.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460002.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460003.西南医科大学附属医院,四川泸州,6460004.西南医科大学附属医院,四川泸州,646000
摘要:目的 探讨钙激活钾离子(IKCa1)通道对宫颈癌HeLa细胞迁移、侵袭及miRNA表达谱的影响.方法 取生长期HeLa细胞,随机分为观察1~5组及DMSO组,分别给予0、10.0、20.0、30.0、40.0μmol/L TRAM-34及等体积DMSO(TRAM-34溶剂)处理24、48和72 h,用划痕实验检测HeLa细胞迁移特性;用Transwell侵袭实验检测48 h细胞侵袭特性.用高通量测序法检测IKCa1通道阻断前后miRNA表达谱的差异,并用qRT-PCR法对部分差异表达miRNAs进行验证.运用miRanda软件预测差异miRNA可能调控的靶基因,并对这些靶基因进行通路富集分析.结果 划痕实验,TRAM-34干预后HeLa细胞迁移受抑制,随着TRAM-34浓度增加及作用时间延长,抑制迁移作用越明显(P<0.001).Transwell侵袭实验显示,HeLa细胞的侵袭率随TRAM-34浓度增加呈递减趋势(F=384.050,P<0.001).通过高通量测序筛选出15个差异有统计学意义而表达上调的miRNA,5个表达下调的miRNA.qRT-PCR结果显示差异性miRNA的表达趋势与测序结果一致.生物信息学分析发现,hsa-miR-143-5p的靶基因在癌症相关通路、p53基因信号通路及MAPK信号通路上出现聚集;而hsa-miR-421的靶基因在肿瘤蛋白多糖、Rap1信号通路和Wnt信号通路出现聚集.结论 阻断IKCa1通道可抑制HeLa细胞迁移和侵袭,影响miRNAs表达谱.
关键词:宫颈肿瘤HeLa细胞IKCa1通道细胞迁移侵袭微小RNA
分类号:R737.33(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金:四川省卫生计生委科研项目(110373)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 24-27 )
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